大黄和肉苁蓉水煎液对家兔离体小肠运动影响的研究

大黄和肉苁蓉水煎液对家兔离体小肠运动影响的研究

于向鹏，马春梅，马旭东，刘雨娟

（河西学院医学院，甘肃张掖734000）

摘要：目的比较大黄及肉苁蓉水煎液对家兔离体小肠平滑肌收缩性的影响。方法取健康成年新西兰家兔十二指肠肠段，随机分为 8 组，分别放入恒温灌流装置中给予不同干预，正常对照组加入 0.2 ml 生理盐水；阳性对照组加入 0.2 ml 浓度为 1∶10000的乙酰胆碱；大黄水煎液组加入0.01 g/ml 的大黄0.2 ml；肉苁蓉水煎液组加入0.01 g/ml 的肉苁蓉0.2 ml；维拉帕米+大黄组先加入维拉帕米0.2 ml，待波形稳定后再加入大黄水煎液0.2 ml；阿托品+大黄组、维拉帕米+肉苁蓉组和阿托品+肉苁蓉组的操作方法同维拉帕米+大黄组。进入VBL-420F 系统，记录其收缩张力和频率的变化。结果阳性对照组、大黄水煎液组、肉苁蓉水煎液组对家兔离体小肠平滑肌收缩频率和收缩波幅均大于正常对照组，阿托品和维拉帕米对家兔离体小肠平滑肌的收缩频率和振幅低于正常对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）；加入肉苁蓉水煎液后，阿托品+肉苁蓉水煎液组对家兔离体小肠平滑肌   的收缩频率及收缩振幅的影响均开始逐渐增高，差异有统计学意义（P＜0.05）；但维拉帕米+肉苁蓉水煎液组对家兔离体小肠平   滑肌收缩频率和振幅的影响均不明显，差异无统计学意义（P＞0.05）；阿托品+大黄组和维拉帕米＋大黄组家兔离体小肠平滑肌   收缩频率和振幅变化与加入前比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。结论大黄及肉苁蓉对家兔离体小肠平滑肌收缩活动均有促进作用，此影响作用均可被维拉帕米阻断，但阿托品能阻断大黄的促进作用却无法阻断肉苁蓉的促进作用。

关键词：大黄；肉苁蓉；离体小肠平滑肌；收缩活动

中图分类号：R285.5文献标识码：ADOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2021.06.025

文章编号：1006-1959（2021）06-0097-04

大黄（rhubarb）为蓼科植物的干燥根和根茎，主产于我国青海、甘肃、四川等地。有泻下攻积，清热泻火，利湿退黄[1]等功效，现代药理学研究发现大黄可通过促进大肠蠕动、离子分泌和减少水分吸收的机制发挥泻下的功效。肉苁蓉（cistanche）为列当科植物肉苁蓉的肉质茎，产于宁夏、甘肃、新疆等地，具有补肾阳、益精血、润肠通便等作用[1]。目前有关大黄和肉苁蓉通便作用的报道较多，但二者是否对离体小肠平滑肌的收缩活动的影响，报道少见。因此，本研究主要通过观察大黄和肉苁蓉对离体小肠平滑肌收缩性的影响，探讨二者促进小肠运动的可能作用机制，旨在为大黄和肉苁蓉的应用提供理论依据。

1材料与方法

1.1实验动物及材料健康成年新西兰家兔（张掖市誉诚医药生物科技有限公司提供）12只，雌雄不限，体重（2.0±0.5）kg。生物信息采集与分析系统（成都泰盟科技有限公司提供，型号：BL-420F）；离体组织器官恒温灌流装置（成都泰盟科技有限公司提供，型号：B20-420F）；生物张力传感器（成都泰盟科析科技有限公司，型号：FT-100）；乙酰胆碱（上海笛柏化学品技术有限公司，生产批号：P/NK900017）；阿托品（河南润弘制药股份有限公司，生产批号：H41020324）；维拉帕米（天津市中央药业有限公司，生产批号：H12020051）；肉苁蓉（甘肃省张掖市广泰药材有限责任公司，批号：190520）和大黄饮片（甘肃省张掖市广泰药材有限责任公司，批号：180913）。

1.2方法

1.2.1大黄、肉苁蓉水煎液制备肉苁蓉水煎液的制备：称取50 g肉苁蓉饮片，加水500 ml，浸泡30 min，煎煮浓缩至300 ml，装瓶消毒；药渣加500 ml的水继续煎煮浓缩至250 ml，合并2次的药液，即得含生药91 mg/ml肉苁蓉水煎液。实验操作时将药物稀释成浓度分别为：0.01 g/ml的肉苁蓉稀释液备用。大黄水煎液的制备同肉苁蓉水。

1.2.2离体小肠标本的制备家兔小肠标本的制备：实验前家兔禁食12 h，自由饮水。木棒敲击其头部，昏迷后快速沿腹正中线开腹，迅速取出十二指肠，分别剪取2.0~3.0 cm的肠段数段，用温热的台式液将肠内容物洗净，置于37℃新鲜台氏液中备用[3]，同时将台式液定容至10 ml，灌流液的温度为（37.0±0.5）℃，并立即通入含95%O2和5%CO2的混合气体。随后将该小肠段随机分配至各实验小组中，小肠段一端用细线固定于张力换能器上，另一端固定于通气管钩上，轻放于灌流管中，更换台式液。将张力换能器与生物信息采集分析系统1、2、3、4、5、6、7、8通道连接，选择实验项目：生理学实验-消化系统-离体小肠平滑肌灌流实验，设置控制参数（增益G：1 mv、时间常数T：3 s、滤波F：50 Hz、扫描速度：5 s/div），记录1 min内肠段收缩变化情况。

1.3实验分组及处理①正常对照组：在灌流液中加入0.85%NaCl 0.2 ml；②阳性对照组：加入浓度为10-6 mol/L的Ach 0.2 ml；③大黄水煎液组：加入浓

度为0.01 g/ml的大黄水煎液0.2 ml；④肉苁蓉水煎液组：加入浓度为0.01 g/ml的肉苁蓉水煎液0.2 ml；

⑤阿托品+大黄组：先加入浓度为10-4 mol/L的阿托品0.2 ml，等波形稳定后，再加0.01 g/ml的大黄水煎液0.2 ml；⑥维拉帕米+大黄组：先加入浓度为10-4 mol/L的维拉帕米0.2 ml，待波形稳定后，再加0.01 g/ml的大黄水煎液0.2 ml；⑦阿托品+肉苁蓉组：操作同⑤和⑥，剂量同④；⑧维拉帕米+肉苁蓉组：操作同⑤和⑥，剂量同④。

1.4统计学方法采用SPSS 20.0进行统计分析，计数资料以（x±s）表示，组间显著性差异采用多因素方差分析，P＜0.05表明差异有统计学意义。

2结果

2.1家兔离体小肠平滑肌正常收缩活动将家兔离体小肠平滑肌放入台式液中，自发活动规律且稳定。阳性对照组对家兔离体小肠平滑肌收缩频率和收缩波幅均大于正常对照组（P＜0.05），具有显著增强效应，见表1、图1、图2。

3讨论

生理状态下，肠道处于不断蠕动状态，促进食糜在肠道内向远端运动，不断消化吸收营养物质，是肠道最基本和最重要的功能[3]。小肠的运动形式的发生都是小肠平滑肌收缩的具体外部表现，可以通过观察小肠平滑肌收缩张力高低和收缩频率快慢来判断小肠兴奋性高低[4]。研究显示，小肠平滑肌自发节律性收缩活动是由小肠纵行肌和环行肌之间的Cajal细胞产生的慢波节律而起步的，任何刺激作用于小肠平滑肌，都是在慢波的基础上产生动作电位，继而引起平滑肌的收缩。因此在适宜的条件下，离体仍然能够保持平滑肌收缩的特性与肠壁神经丛的作用。扶垭东等[5]研究发现大黄中结合蒽醌及可水解鞣质具有促进胃肠运动及泻下的作用。朱金照等[6]研究发现大黄对大鼠小肠运动有明显的促进作用，其机制可能与促进肠道MTL及SP的释放和抑制VIP的释放有关；而李红芳等[7]发现大黄水煎剂可使十二指肠纵行肌收缩波平均振幅降低，从而抑制其活动，使十二指肠舒张。由此可见，有关大黄对肠管平滑肌运动的作用结果也不同。但本实验发现低浓度的大黄水煎液对家兔离体十二指肠平滑肌的收缩频率、幅度均具有促进作用。

肉苁蓉具有“润肠通便”的作用，其作用比较缓和，对治疗产妇、老年人和身体虚弱等人群有很好的效果[8]。研究证明，肉苁蓉总寡糖、去半乳糖总寡糖和半乳糖醇均能增强肠蠕动，有效改善肠肌运动功能；本实验结果显示肉苁蓉水煎液能明显促进家兔离体小肠平滑肌收缩活动，与既往研究一致。

乙酰胆碱可激动肠道平滑肌细胞膜上的M受体，兴奋胃肠平滑肌并产生强烈的收缩运动。加入0.01 g/ml的大黄、肉苁蓉水煎液后，对其十二指肠平滑肌收缩频率，收缩振幅的兴奋作用的影响几乎与乙酰胆碱相同。这表明大黄和肉苁蓉水煎液与乙酰胆碱对十二指肠肠平滑肌兴奋作用的影响具有同等程度的促进作用，二者对离体十二指肠收缩频率的影响作用无明显差异，但大黄能明显增加其收缩幅度。

阿托品与乙酰胆碱是阻断M胆碱受体的抗胆碱药，具有松弛内脏平滑肌，解除平滑肌痉挛的作用；同时能抑制腺体分泌等作用。本实验结果显示，阿托品不能对肉苁蓉水煎液兴奋家兔离体小肠平滑肌收缩作用起到抑制作用，这说明肉苁蓉能改善阿托品对M受体阻断作用，却并不能确定肉苁对小肠平滑肌收缩功能的增强作用机制是兴奋了M受体；但是阿托品可明显抑制大黄对家兔离体十二指肠平滑肌收缩活动的促进作用，这与吕金胜等[9]的研究结果一致，但其作用机制还有待于进一步的研究。

维拉帕米作为第一类钙通道阻滞剂，对小肠平滑肌细胞上钙离子通道的阻断作用可使小肠的收缩活动变弱，自动节律的运动也会减弱[10]。本实验结果显示，维拉帕米可明显阻断大黄、肉苁蓉对家兔离体小肠平滑肌收缩的促进作用，由此可见，二者促进家兔离体十二指肠平滑肌收缩活动的作用机制可能是促进了平滑肌细胞膜上钙离子通道开放，钙离子内流有关。

综上所述，大黄及肉苁蓉对家兔离体小肠平滑肌收缩活动的幅度和频率均有促进作用，但其作用机制却有所不同：相同之处是，二者均能通过促进细胞外液中钙离子的内流而增加小肠平滑肌的收缩张力和收缩频率；不同之处是，大黄可能通过与小肠平滑肌细胞膜M受体的结合而发挥兴奋效应，但肉苁蓉却无此影响作用。

参考文献：

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典:2015年版一部[M].北京:中国医药科技出版社,2015.

[2]廖博,陈鹏飞,伍莉.大黄浸泡液对家兔离体十二指肠平滑肌运动的影响[J].中国兽医杂志,2015,51(11):91-92.

[3]刘亭秀,宋庆,李静,等.核桃叶提取液对家兔离体小肠平滑肌收缩活动的影响[J].右江民族医学院学报,2015,37(1):11-13.[4]KoeppenBM,StantonBA.Berne＆Levy Physiology[M].7th ed.St Louis:Elsevier,2017.

[5]扶垭东,张晶,刘颖,等.生、熟大黄饮片及其活性组分的泻涩双向调节作用分析[J].中国实验方剂学杂志,2019,25(11):127-132.

[6]朱金照,冷恩仁,史洪涛,等.大黄促进肠道运动的机制探讨[J].解放军药学学报,2002(6):339-340,346.

[7]李红芳,汪龙德,郑天珍,等.大黄水煎剂对离体兔Oddi括约肌和十二指肠平滑肌收缩活动的影响[J].兰州医学院学报,2003(3):1-2,9.

[8]高云佳,姜勇,戴昉,等.肉苁蓉润肠通便的药效物质研究[J].中国现代中药,2015,17(4):307-310,314.

[9]吕金胜,何凤慈,刘震东,等.大黄素对动物离体回肠收缩作用的影响[J].中国药业,2000,3(11):25.

[10]吴瑞峰,刘俊峰,高杨,等.钙离子拮抗剂维拉帕米对人食管下括约肌舒缩的调节机制[J].中华胸部外科电子杂志,2015,2(3):19-22.