肉苁蓉中功能因子测定及提取研究进展

肉苁蓉中功能因子测定及提取研究进展

◎夏美茹，张青，孙志惠，朱效兵

（河套学院农学系，内蒙古巴彦淖尔015000）

摘要：肉苁蓉具有较高的营养和保健功能。本文旨在分类总结肉苁蓉功能因子的提取及其测定方法，为肉苁蓉功能因子的提取、测定及相关领域的进一步研究提供参考。

关键词：肉苁蓉；功能因子；提取测定方法

肉苁蓉，多年生草本列当科肉苁蓉属植物，多寄生于藜科梭梭属植物的根部[1]，生长于半荒漠和荒漠地区，主产于内蒙古自治区（阿拉善盟、巴彦淖尔市）、甘肃省、新疆维吾尔自治区等地。在历代中医补肾壮阳类药物中，使用肉苁蓉的频度很高，因为其功效显著，长于沙漠，被美誉为“沙漠人参”[2]，2018年被列为药食同源类植物。资料显示，肉苁蓉有益肾壮阳[3]、润肠通便[4]、护肝[5]、调节免疫力[6]、抗肿瘤、抗氧化、抗疲劳[1,7]、抗福射、保护神经系统与改善健忘等作用[8-10]，遂引起了国内外众多学者的探究。本文综合有关肉苁蓉功能因子检测技术文献，旨在为肉苁蓉功能因子测定方法及提取工艺提供参考。

1肉苁蓉的功能因子

从20世纪80年代以来，国内外学者对肉苁蓉的功能因子进行了大量的研究[11-12]，并取得了极大的进展。研究者们对肉苁蓉进行了分析，从中分离得到28种苯乙醇苷类成分（见表1）[14-16]；周玉碧等[17]采用气相-质谱联用法分析了肉苁蓉脂溶性提取物中的化学成分，共鉴定了73种化合物。另外，文献报道肉苁蓉中还检出多糖类、黄酮类、环烯醚萜甙、木脂素类、生物碱、氨基酸与微量元素等化学成分[14,18]。

2肉苁蓉主要功能因子的提取及测定

2.1多糖类

多糖是肉苁蓉的主要功能因子之一，其具有抗衰老、抗肿瘤、调节免疫力等作用[19]。连乐等[19]研究得出肉苁蓉多糖超声波提取工艺：料水比1∶25，提取温度60℃，提取时间75 min，含量为18.90%。肖星辉等[20]探究得出水浸提法提取肉苁蓉多糖：料液比1∶55，温度75℃，提取165 min，多糖提取率为18.40%。高建德等[21]确定了复合酶提取肉苁蓉多糖的最佳工艺：复合酶用量0.2%，酶解温度50℃，酶解1.5 h。肖道安[22]采用蒽酮-硫酸法测定肉苁蓉多糖含量，用吐温60协同超声提取肉苁蓉多糖：表面活性剂为0.5%吐温60，料液比1∶25，温度60℃，提取时间30 min，多糖得率为8.17%。裴爱田[23]研究得出肉苁蓉粗多糖脱蛋白工艺：蛋白酶添加量125.6 U·mL-1，酶解温度30.0℃，酶解时间96.1 min，pH为5.4。肖星辉等[20]探究肉苁蓉最适去蛋白工艺为木瓜蛋白酶用量0.2%，温度50℃，时间2 h，多糖的保留率可达96.00%。

在肉苁蓉多糖脱色方面，裴爱田[23]的研究结果：活性炭添加量为2.5%，温度50℃，吸附40 min。肖星辉等[20]认为AB-8大孔树脂脱色优于活性炭脱色，其工艺为：上样浓度4 g·L-1，洗脱液为60%乙醇，流速1 mL·min-1。

2.2黄酮类

肉苁蓉黄酮类物质有改善睡眠、调节机体机能、抗衰老等功效。张瑞平[24]研究乙醇提取法提取肉苁蓉总黄酮：乙醇浓度70%、料液比1∶30、提取时间2 h、温度40℃，提取率为9.33%。罗岩[25]研究超声波辅助提取法提取管花肉苁蓉中黄酮类物质：乙醇体积分数70%，料液比1∶30，提取40 min，提取2次，测定含量为8.45 mg·mL-1。杨凯等[26]研究表面活性剂水溶液作为提取剂提取肉苁蓉总黄酮：水溶液提取剂为0.2%的十二烷基硫酸钠，料液比（g∶mL）1∶20，提取温度80℃，提取1.0 h，肉苁蓉黄酮的提取率可达7.34%。

肖星辉等[27]研究乙醇-盐双水相萃取法萃取肉苁蓉总黄酮的工艺：50%的乙醇，料液比1∶5（0g∶mL），提取时间3.5 h，温度90℃，总黄酮平均得率可达（13.04±0.06）%；最佳双水相分离体系为Et OH-K2HPO4，分离条件为70%EtOH、0.2 g·mL-1 K2HPO4，荒漠肉苁蓉提取液体积分数14%。徐常永等[28]通过静态吸附实验，得到AB-8型大孔吸附树脂分离纯化肉苁蓉总黄酮的工艺条件：最佳吸附条件，上样液浓度1.5 mg·mL-1，流速3 mL·min-1，pH=6；最佳解吸附条件，80%的乙醇以3 mL·min的流速洗脱，使用12倍柱床体积，分离纯化后总黄酮的质量分数为72.35%。

2.3苯乙醇苷

苯乙醇苷类化合物是肉苁蓉的主要功能因子之一，其主要成分为松果菊苷和毛蕊花糖苷[29]，有着补肾壮阳、保护肝脏、抗氧化与调节免疫力等作用[30]。

2.3.1苯乙醇总苷

丁慧玲等[31]优化超声-微波回流提取肉苁蓉中苯乙醇苷工艺，得到在超声频率40 kHz，功率50 W，提取15 min时，最优工艺条件为丙酮体积分数50%，液料比14∶1（mL∶g），微波功率100 W，验证实验得率与理论值接近。黄翔等[32]研究不同干燥方式对肉苁蓉中5种苯乙醇苷类成分的影响，得出最佳提取工艺：甲醇体积分数55.14%，液料比46.39，提取时间38.50 min。刘丽莎[33]等研究肉苁蓉苯乙醇苷水溶媒提取最佳工艺：原料粒径>40目，料液比1∶15，80℃下浸提2 h，提取率为（175.9±1.1）mg·g-1。

刘朋龙等[34]应用AB-8型大孔树脂分离纯化肉苁蓉苯乙醇苷：上样液浓度1.2 mg·mL-1，上样流速1.5 BV·h-1，吸附时间1.5 h；解析时间4 h，体积分数40%的乙醇洗脱，洗脱流速1.5 BV·h-1。裴文静[29]研究了高剪切均质化提取法纯化肉苁蓉苯乙醇苷：乙醇浓度50%，提取温度70℃，高剪切均质乳化机转速16 000 r·min-1，高剪切均质乳化2 min，料液比1∶9，提取1次。余逸凡等[35]优化了大孔吸附树脂分离纯化荒漠肉苁蓉总苷的工艺条件。结果表明，D-101为纯化的较佳树脂，上样液浓度2.0 mg·mL-1，流速2 mL·min-1；洗脱液体积6 BV为较佳吸附条件，该条件下纯化后总苷含量为纯化前的28.85倍。

2.3.2松果菊苷

周海燕等[36]采用HPLC法，以C18为色谱柱，甲醇-0.1%甲酸为流动相，梯度洗脱，体积流量1.0 mL·min-1，柱温35℃，检测波长330 nm，松果菊苷在0.025 5～0.612 0 mg·mL-1范围内线性关系良好，平均回收率为100.59%。

初侨等[37]采用闪式技术提取肉苁蓉中松果菊苷：60%乙醇，闪提转速5 500 r·min-1，提取90 s，料液比1∶30（g∶mL），松果菊苷的提取率为8.87 mg·g-1。王怀煦[38]探究采用大孔树脂纯化肉苁蓉中松果菊苷的工艺：大孔树脂运用HPD100，6 BV的50%乙醇洗脱，气平均收率为91.4%。

2.3.3毛蕊花糖苷

初侨等[37]采用闪式技术提取肉苁蓉中毛蕊花糖苷，最佳提取工艺同初侨的松果菊苷提取工艺，毛蕊花糖苷的提取率为6.60 mg·g-1。孔征等[39]优化提取肉苁蓉毛蕊花糖苷最优工艺为乙醇浓度63%、液料比8∶1（mL∶g）、浸泡2 h、提取1.5 h、提取2次。李明国[40]建立了肉苁蓉中毛蕊花糖苷的高效毛细管电泳测定方法：电压8 kV，运行缓冲溶液30 mmol·L-1硼酸-硼砂（pH=9.0），室温，检测波长334 nm。毛蕊花糖苷的浓度在0.015～0.375 mg·mL-1范围内线性关系良好，样品回收率为99.26%。孔征等[38]测定肉苁蓉毛蕊花糖苷含量，采用高效液相色谱法：色谱柱为Inertsil-ODS-3V，甲醇-0.2%甲酸水溶液（40∶60，V∶V）作为流动相，进样量10流速1 mL·min-1，柱温30℃，检测波长330 nm。毛蕊花糖苷检测质量浓度的线性范围为18.65～932.4μg·mL-1。

2.3.4红景天苷

李明国等[41]建立高效毛细管电泳色谱法测定肉苁蓉中红景天苷含量的方法。采用毛细管区带电泳（CZE）：运行缓冲液30 mmol·L-1硼酸-硼砂缓冲液（pH=9.00），电压8 kV，柱温25℃，波长278 nm，红景天苷含量在0.007～0.140 mg·mL-1的浓度范围内线性关系良好[40-41]。

2.4多酚类物质

张春玲[42]研究建立了紫外-可见分光光度法测定肉苁蓉中多酚类物质（以没食子酸计）含量的方法：70%的乙醇、料液比为1∶20、60℃、提取30 min，肉苁蓉中多酚类物质的提取效果最好，平均质量百分比为0.242 2%。栾朝霞[43]优化大孔树脂纯化肉苁蓉多酚提取物：适用HPD-400大孔树脂，上样溶液60 mL，6 mg·mL-1，流速2 mL·min-1；采用60%的乙醇180 mL、1 mL·min-1流速洗脱。

3结语

肉苁蓉主要功能因子的提取及测定方法较多，笔者对常用方法进行了归纳总结，选出每种测定方法的最优工艺条件供读者参考。

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