肉苁蓉总苷对60Coγ射线照射小鼠造血系统损伤保护作用的研究＊

肉苁蓉总苷对60Coγ射线照射小鼠造血系统损伤保护作用的研究＊

蒋晓燕 王晓雯 王雪飞 毛新民 李琳琳 堵年生

(新疆医科大学基础部药理学教研室,乌鲁木齐830054)

中国图书分类号R 282.71;R 322.2;R 818;R 973

文献标识码A文章编号1001-1978(2000)03-0332-04

摘要   目的研究肉苁蓉总苷(GCs)对60 Coγ射线照射小鼠造血系统损伤的辐射防护作用,探讨其作用机制。方法连续动态观察GCs对小鼠经60 Coγ射线照射后d 3,d 7,d 14,d 21外周血血红蛋白、白细胞、网织红细胞、骨髓有核细胞数、脾集落数(CFU-S)以及骨髓细胞硒-谷胱甘肽过氧化物酶(Se-GSH-Px)活性和丙二醛(M DA)含量的影响。结果辐射损伤后小鼠外周血白细胞、网织红细胞、骨髓有核细胞数、CF U-S明显减少,骨髓细胞及脾Se-GSH-P x活性降低,M DA含量明显增加。G Cs可促进上述各造血指标的恢复,提高Se-G SH-Px活性,降低M DA含量。结论GCs对受照小鼠造血系统具有保护作用,其机制可能与抗氧化作用有关。

关键词   肉苁蓉总苷;造血系统;辐射损伤;抗氧化作用

肉苁蓉〔Cistanche Salsa(C.A.Mey)G.Beek〕,具补肾、益精、润燥滑肠之功效。肉苁蓉粗制剂可增强小鼠红细胞SOD活性,显著降低心肌脂褐质含量,提高阳虚动物DNA的合成能力[1]。而肉苁蓉总苷(G Cs)具有抗氧化作用[2],对核酸有辐射防护作用[3]。但GCs对照射损伤小鼠造血系统的防护作用未见报道,本实验观察GCs对60Coγ照射损伤小鼠造血功能相关指标及生化指标的影响,并阐明其机制。

1材料和方法

1.1药品与试剂肉苁蓉总苷(glycosides of cis-tanche,GCs),由本院药学系植化教研室堵年生教授提供;黄芪(A st ragalus Membranaceus,AM)注射液,上海福达制药有限公司生产;1,1,3,3-四乙氧基丙烷(1,1,3,3-tet raethoxy propane,TEP),为Sigma产品;5,5′-二硫代双(2-硝基苯甲酸)〔5,5′-di thio-bis(2-nit robenzoic acid),DTNB〕,为Fluka产品;考马斯亮兰(Coomassle Brilliant Blue,CBB)G 250,为Flu-ka产品;还原型谷胱甘肽,中科院上海生化所东风生化技术公司产品。

1.2照射条件60Coγ射线一次性全身均匀照射,照射剂量率为3.89×10-2 Cy·kg-1,距离0.80 m。损伤组及各给药组小鼠受照剂量为6 Gy,受体组小鼠(用于脾集落的观察)受照剂量为8 Gy。

管花肉苁蓉-新疆肉苁蓉

1.3动物NIH小鼠,体重(20±2)g,♀♂兼用,由新疆流行病研究所提供,生产证号为医动字第16—001号。随机分为7组,①正常组:生理盐水(N S)20 ml·kg-1;②损伤组:给予NS 20 ml·kg-1;③GCs组:分别给予GCs 62.5、125、250 mg·kg-1;④阳性对照组:黄芪注射液(生药)65 g·kg-1;以上各组均在照射前7 d及照射后持续ig,每日1次。⑤受体组:接受照射剂量8 Gy,仅作受体使用。

1.4观察指标及检测方法

正常组、损伤组及各给药组分别于照射后d 3、d 7、d 14、d 21摘取眼球取血测定Hb含量、WBC计数、网织红细胞计数、并迅速颈椎脱臼处死小鼠,制备骨髓有核细胞悬液,计数骨髓有核细胞及测定CFU-S。

1.4.1造血功能指标测定Hb含量测定、WBC计数、网织红细胞计数、骨髓有核细胞数,按常规测定计数;脾集落(colony forming uni t-spleen,CFU-S)测定参见文献[4],采用外源性脾集落形成法。

1.4.2生化指标测定骨髓细胞的冲洗:分别将照射后d 3、d 7、d 14、d 21小鼠颈椎脱臼法处死,取双侧股骨,用1 m l NS通过5 1号针头冲出全部骨髓细胞,反复冲洗干净,匀浆,3 000 r·min-1,离心30min,取上清液待测。每个测量指标均进行蛋白含量修正。测定Se-GSH-P x活性用DTNB直接法[5];MDA用TBA显色法[6];蛋白质定量用CBB-SDS法[7]。

1.5统计方法各项数据均以x±s表示,实验数据经方差齐性检验后,采用F检验。

本实验观察到小鼠受照射后造血系统受到损伤,外周血Hb、WBC、网织红细胞、骨髓有核细胞数(NN BMC)以及CFU-S数不同程度地降低;骨髓细胞Se-G SH-Px活性降低,MDA含量增多,与文献报导一致[11]。GCs能明显促进受照射小鼠外周血WBC、网织红细胞、N NBMC及CFU-S的恢复,增强骨髓细胞Se-G SH-Px活性,并降低M DA含量。本室研究表明[3],GCs能增强受照小鼠红细胞内SOD活性,促进受照小鼠脾RNA、DN A含量的恢复。本文结果提示GCs对造血系统的辐射保护作用可能是:增加自由基清除酶活性,清除辐射过程中脂质过氧化物的形成,间接抑制脂质过氧化分解产物对造血系统的损伤,从而保护造血干细胞,促进其增殖、分化,有利于造血功能的恢复,也可能与促进骨髓细胞RNA、DN A和蛋白质合成,保护造血干细胞的造血功能有关,其机制有待进一步深入探讨。

参考文献（不完全展示）

1周志锦.肉苁蓉的研究进展.中医药信息,1995;12(5):28～30

2王晓雯,王雪飞,李玉琪et al.肉苁蓉总苷抗脂质过氧化作用的研究.西北药学杂志,1997;12(增刊):37

3李琳琳,王晓雯,王雪飞et al.肉苁蓉总苷的抗脂质过氧化作用及抗辐射作用.中国中药杂志,1997;22(6):364～7