［摘要］目的：探讨肉苁蓉总苷(GCs)对三氯化铝(A1CL)皮下注射(sc)致小鼠拟阿尔釆末病(AD)模型小鼠学习记忆障碍的保护作用及其机制。方法：以A1C13(60 mg-kg1,sc,7 d)致小鼠学习记忆障碍模型，维生素E为阳性对照，采用小鼠跳台试验和迷宫试验观察GCs(62.5,125,250 mg-kg-1,ig,20 d)对小鼠学习记忆障碍的保护作用，并测定GCs对小鼠脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量和脑重系数的影响。结果：GCs各个剂量组均能改善A1C13所致学习记忆障碍，增加脑组织中SOD活性，降低MDA含量，并使脑重系数增加。结论：肉苁蓉总苷对A1C13致小鼠学习记忆障碍具有保护作用，其作用机制可能与其抗氧化作用有关。

［中图分类号］R285；R965［文献标识码］A

铝是一种慢性神经毒物，是致阿尔采末病（Alzheimer's disease,AD）的一个重要的危险因素E,可引起AD的一系列特征性表现，故在进行防治AD的药物研究中常以三氯化铝（aluminum trichlonde,A1C13）模拟AD动物模型料。许多研究表明，铝可增强脑组织中的脂质过氧化水平，脂质过氧化产物丙二醛（MDA）的含量间接反映了脂质过氧化的程度，从而反映神经元受损程度，超氧化物歧化酶（SOD）活力的高低间接地反映了机体清除自由基的能力⑶。肉苁蓉（herba cistanches）俗名大芸，为列当科植物，是一味著名的补益中药，具有补肾阳、益精血、抗衰老、抗氧化等方面功效'叫。肉苁蓉总苷（glycosides of cistanche,GCs）是从新疆管花肉苁蓉中提得，主要成分是苯乙醇总苷。本课题组多年来已对GCs的抗氧化同，清除自由基闽，抗衰老衍等药理作用进行了深入的研究。本实验釆用皮下注射（sc）A1C1,致拟AD小鼠的急性模型，观察GCs对A1C1,所致的拟AD模型小鼠学习记忆障碍的保护作用，并探讨其抗AD作用与其抗氧化作用的关系。

材料与方法

药品与试剂GCs（紫外方法测定纯度＞50%）由新疆医科大学药学院植物化学室按日本文献［公开特许公报（A）昭63-198627］方法，从新疆管花肉苁蓉植物中提得，主要成分是苯乙醇甘类；维生素E（上海建安制药厂，规格每粒100 mg）；考马司亮兰CBBGe试剂盒、MDA含量测定试剂盒、SOD活性测定试剂盒，购自南京建成生物工程研究所；A1C13-6H2O,分析纯，由天津市化学试剂三厂出品。

仪器LSY型电热恒温水浴锅，北京医疗设备厂生产；电子秤，北京塞多利斯天平有限公司生产；LYJ-DI型离心沉淀机，江苏响水医疗器械r；721分光光度计，上海第三分析仪器厂；WH-851旋涡混合器，上海环球物化仪器厂；TN型托盘式扭力天平，上海第二天平仪器厂；XZC-5A小白鼠刺激型跳台，张家港市三兴教学机械厂；MG-B型迷宫刺激器，张家港市三兴教学机械厂。动物分组及模型制备回雄性昆明种小鼠60只，体重（22.0±s 2.0）g,由新疆医科大学实验动物中心提供随机分为6组。于dl至d7进行造模，生理盐水（NS）组小鼠sc NS,其余各组小鼠sc A1C1,60 mg-kg-'o成模后：（1）NS组9只（对照组）；（2）模型组9只；（3）维生素E组8只（阳性对照组，维生素E 50 mg-kg-1）；（4）GCs组（设低、中、高剂量组每组8只，GCs剂量分别为62.5,125',250 mg-kg-＞）0于造模前7 d开始ig给药，NS组和模型组小鼠ig NS,维生素E组和GCs组小鼠分别ig维生素E和GCs,每组ig给药体积一致，每日1次，连续给药，共20 d。

观察指标及检测方法

1小鼠被动回避性跳台实验装置为80 cm x 16 cm x 40 cm的茶色有机玻璃箱，箱底铺有铜栅作为刺激电极，内设高4.5 cm,直径6.5 cm的橡皮垫作为回避电击的安全平台。先放入小鼠适应5 min,随后通以36 V交流电，小鼠遭到电击后跳上安全平台，如从台上跳下，双足接触铜栅为错误反应。记录3 min内出现的错误反应次数。以小鼠学习过程中出现反应的潜伏期和错误反应次数来评价学习记忆能力。

2迷宫实验将小鼠放入三等臂Y型迷宫箱测试小鼠学习记忆能力，反应箱设三条通道，其顶端有一盏15 W的信号灯，箱底可施以电击，训练小鼠按信号灯跑向安全通道。电压35 V,同时记录小鼠能找到安全区的次数，每次时间为30 s,共10次，以小鼠的错误次数作为学习记忆成绩。

3生化指标于造模后20 d断头取脑，制成10%脑匀浆，按试剂盒说明书测定SOD活性、MDA含量。考马斯亮兰CBB-SDS法进行脑组织蛋白质含量测定。

4脑重系数的测定倒小鼠断头处死，速取脑桥基底部上缘水平以上全脑，立即用冷NS冲洗，用滤纸拭去多余的水分，按以下公式计算系数：脑重系数=脑湿重（g）/体重（g）x 100%。

统计学方法釆用PEMS3.0统计软件包，数据用均数土标准差（%±5）表示，组间比较釆用方差分析g检验。

结果

小鼠状况NS组小鼠状况良好，进食良好。被毛浓密而有光泽，眼睛有神，反应灵敏，动作灵活，肌肉有弹性；模型组多数表现为动作不灵活，并见竖毛，身体蜷缩，维生素E和GCs组在活动方面较模型组小鼠为好，被毛有光泽，蜷缩者较少。

肉苁蓉-管花肉苁蓉-西域苁蓉

肉苁蓉总苷对三氯化铝致小鼠学习记忆障碍的保护作用_罗兰_02.png

经研究发现，GCs具有抗氧化、清除自由基四、抗衰老等作用。本研究亦发现GCs可改善铝中毒致拟AD模型小鼠学习记忆功能，提高拟AD小鼠脑组织中SOD活性，降低MDA含量，同时提高脑重系数。已有研究表明，自由基所致的氧化防御系统受损和脂质过氧化水平升高相互作用，进而导致体内氧化损伤加剧，是AD发病的重要原因之一。本研究说明GCs提高A1C1,所致拟AD模型小鼠学习记忆能力。作用机制可能与其增加自由基清除酶的活性阳气防止脂质过氧化作用，减轻脑萎缩，保护神经元功能有关。关于GCs是否作用于过氧化氢酶活性及脑组织中5-羟色胺阳性细胞染色计数尚待进一步研究。

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